Recombinant SARS-CoV-2 Spike RBD Fc Chimera، کیڑے کے خلیے حاصل کیے گئے (rSARS-CoV-2SpikeRBD-Fc,InsectCell, , ) CAS#: 6261-049-1816; ChemWhat کوڈ: 1404755
سرکاری مکمل نام
Recombinant SARS-CoV-2 Spike RBD Fc Chimera، کیڑے کے خلیے حاصل کیے گئے (rSARS-CoV-2SpikeRBD-Fc، InsectCell)
ترتیب
امینو ایسڈ کی ترتیب
مترادفات
الحاق نمبر
جین آئی ڈی
خلاصہ
SARS-CoV-2، جو عالمی وبائی کورونا وائرس کی بیماری 2019 (COVID-19) کا سبب بنتا ہے، وائرس کے ایک خاندان سے تعلق رکھتا ہے جسے کورونا وائرس کہا جاتا ہے جو عام طور پر چار ساختی پروٹینوں پر مشتمل ہوتے ہیں: اسپائک پروٹین (S)، لفافہ پروٹین (E)، جھلی پروٹین (M)، اور نیوکلیو کیپسڈ پروٹین (N)۔ SARS-CoV-2 سپائیک پروٹین (S Protein) ایک گلائکوپروٹین ہے جو جھلی کے فیوژن اور وائرل انٹری میں ثالثی کرتا ہے۔ ایس پروٹین ہوموٹریمیرک ہے، ہر ~180-kDa مونومر کے ساتھ دو ذیلی یونٹس، S1 اور S2 پر مشتمل ہے۔ SARS-CoV-2 میں، جیسا کہ زیادہ تر کورونا وائرس کے ساتھ، S پروٹین کی دو الگ الگ پیپٹائڈس، S1 اور S2 ذیلی یونٹس میں پروٹیولائٹک کلیویج ایکٹیویشن کے لیے ضروری ہے۔ S1 سبونائٹ میزبان ریسیپٹر کے ساتھ پروٹین کو منسلک کرنے پر مرکوز ہے جبکہ S2 سبونائٹ سیل فیوژن کے ساتھ شامل ہے۔ ساختی حیاتیات کے مطالعے کی بنیاد پر، ریسیپٹر بائنڈنگ ڈومین (RBD)، جو S1 کے C-ٹرمینل علاقے میں واقع ہے، کو یا تو اوپر/کھڑے یا نیچے/لیٹی حالت پر مبنی کیا جا سکتا ہے۔ کھڑی حالت زیادہ روگجنکیت سے وابستہ ہے اور SARS-CoV-1 اور MERS دونوں اپنے متعلقہ RBDs میں لچک کی وجہ سے اس حالت تک رسائی حاصل کر سکتے ہیں۔ ایسا ہی دو ریاستی ڈھانچہ اور لچک SARS-CoV-2 RBD میں پائی جاتی ہے۔ امینو ایسڈ (aa) ترتیب ہومولوجی کی بنیاد پر، SARS-CoV-2 S1 سبونائٹ RBD کی SARS-CoV-73 S1 RBD کے RBD کے ساتھ 1% شناخت ہے، لیکن MERS S22 RBD کے ساتھ صرف 1% ہم آہنگی ہے۔ کم AA ترتیب ہومولوجی اس تلاش کے ساتھ مطابقت رکھتی ہے کہ SARS اور MERS مختلف سیلولر ریسیپٹرز کو باندھتے ہیں۔ SARS-CoV-2 وائرس کا S پروٹین، SARS-CoV-1 ہم منصب کی طرح، Angiotensin-Converting Enzyme 2 (ACE2) کو جوڑتا ہے، لیکن بہت زیادہ تعلق اور تیز تر پابند حرکیات کے ساتھ۔ ACE2 ریسیپٹر سے منسلک ہونے سے پہلے، S1 ٹرائمر کا ساختی تجزیہ ظاہر کرتا ہے کہ trimeric ڈھانچے میں RBD ڈومینز میں سے صرف ایک "اوپر" کنفارمیشن میں ہے۔ یہ ایک غیر مستحکم اور عارضی حالت ہے جو trimeric subunits کے درمیان سے گزرتی ہے لیکن اس کے باوجود اینٹی باڈی تھراپی کو بے اثر کرنے کے لیے نشانہ بننے والی ایک بے نقاب حالت ہے۔ SARS-CoV-2 پروٹین کے RBD کے پولی کلونل اینٹی باڈیز کو ACE2 ریسیپٹر کے ساتھ تعامل کو روکنے کے لیے دکھایا گیا ہے، جو کہ RBD کو ویکسینیشن یا اینٹی وائرل تھراپی کے لیے ایک پرکشش ہدف کے طور پر تصدیق کرتے ہیں۔ یہ بھی امید افزا کام ہے جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ RBD کا استعمال مریض کے خون میں موجود اینٹی باڈیز کی موجودگی کا پتہ لگانے کے لیے کیا جا سکتا ہے، جو کہ SARS-CoV-2 وائرس کے سامنے آنے کے بعد استثنیٰ کی نشوونما کے مطابق ہے۔ آخر میں، یہ ظاہر کیا گیا ہے کہ ایس پروٹین CD147/EMMPRIN ریسیپٹر اور ثالثی جھلی فیوژن کے ذریعے میزبان خلیوں پر حملہ کر سکتا ہے۔
ماخذ
کیڑے سیل
سالماتی وزن
حیاتیاتی سرگرمی
عمل میں ٹیسٹ۔
ظاہری شکل
سفید لائوفیلائزڈ (منجمد خشک) پاؤڈر۔
تشکیل
PBS، pH 0.2، 7.0% Trehalose میں 5 um فلٹر شدہ مرتکز محلول سے لائو فلائز کیا گیا۔
اینڈوٹوکسین
rSARS-CoV-0.1 Spike RBD-Fc کا 2 EU/ug سے کم جیسا کہ LAL طریقہ سے طے ہوتا ہے۔
تنظیم نو
ہم تجویز کرتے ہیں کہ مواد کو نیچے تک لانے کے لیے کھولنے سے پہلے اس شیشی کو مختصر طور پر سینٹری فیوج کیا جائے۔ PBS میں 0.1-1.0 mg/mL کے ارتکاز میں دوبارہ تشکیل دیں۔ اسٹاک سلوشنز کو ورکنگ ایلی کوٹس میں تقسیم کرکے ≤ -20 °C پر اسٹور کیا جانا چاہیے۔ مناسب بفرڈ محلول میں مزید ڈائیوشنز کیے جائیں۔
استحکام اور ذخیرہ
دستی ڈیفروسٹ فریزر کا استعمال کریں اور بار بار منجمد پگھلنے کے چکروں سے گریز کریں۔- وصولی کی تاریخ سے 12 ماہ، -20 سے -70 °C جیسا کہ فراہم کیا گیا ہے۔- 1 مہینہ، 2 سے 8 ° C تک جراثیم سے پاک حالات میں دوبارہ تشکیل دینے کے بعد۔- 3 ماہ، دوبارہ تشکیل دینے کے بعد جراثیم سے پاک حالات میں -20 سے -70 ° C۔
